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我院完成制备NK细胞标准化体系建设

发布时间:2017-12-20 浏览次数:8041次 字体大小【  】 关闭

12月15日我院肿瘤生物治疗中心GMP实验室梁俊青博士团队完成NK细胞体系建设。并随后为相关人员进行了系统培训,包括:合理的生产过程、严格的检测系统和完善的质控体系。




NK扩增核心技术——IL-21跨膜系统的技术特点


初次激活:使用30毫升NK细胞培养液重悬离心后或复苏的全NK细胞,数量为20百万;第1-2天,观察培养液颜色变化及细胞成团情况。第3天换液:转移细胞悬液进入50毫升离心管,340g 离心5分钟;弃去上清,加入30毫升NK细胞培养液重悬培养。第4-6天,观察培养液颜色变化,显微镜下观察细胞状态,根据细胞生长状况添加适量培养液。第7天二次激活:40度水浴解冻滋养细胞A2,340g 离心3 min,将滋养细胞加入NK细胞中进行二次激活。第8-11天扩大培养:每日进行细胞观察和计数,通过添加培养液调节细胞浓度在1×106cells/ml左右。如果培养液体积大于250ml则转入细胞培养袋中培养。第12-13天继续培养:第12天培养液加满培养袋(1.8-2L),进行无菌检测取样。第13天观察记录细胞状态。第14天收集:进行细胞的收集冻存或收集配制注射液。细胞量50-80亿。

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